captura hibrida phv

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Health & Medicine

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  • CARTURA HIBRIDA PARA DIAGNOSTICO DE VIRUS DE PAPILOMA

    SANCHEZ ECHAVARRIA PAULA

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  • HISTORIA

    En 1917, George Nicholas Papanicolaou (1883-1962) En el ao 2008, el mdico alemn Harald zur Hausen (1936-) recibi el Premio Nobel de Medicina por el descubrimiento de VPH como una causa de cncer cervical.

  • PVHPVH es una de las INFECCIONES de transmisin sexual ms comunes.Es tambin la causa principal de los cambios precancerosos en el cuello uterino y del cncer de cuello uterino. Por lo menos 1 de cada 3 mujeres jvenes sexualmente activas ha tenido una infeccin genital por PVH. Cualquier persona sexualmente activa, puede contraer PVH.

    ADN VIRALCAPSIDE PM L1

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  • PVH EPITELIALPVH MUCOSO

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  • Historia Natural de la EnfermedadAdaptado de Gravitt PE & Jamshidi R. Infect Dis Clin N Am 2005;19:439-58

    Diapositiva 10Progresin de la enfermedad En esta diapositiva se muestra visualmente el desarrollo progresivo de los cambios celulares de la infeccin HPV al cncer cervical. Este proceso generalmente necesita 10 a 40 aos, aunque en muy pocos casos puede ocurrir en 1 o 2 aos.1 Los cambios CIN I pueden surgir luego de 3 meses desde la infeccin, CIN II al cabo de 6 meses, y CIN III en cuestin de 1 a 2 aos. Como se muestra en la diapositiva, las clulas anormales infectadas y CIN I tambin pueden designarse lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado (LSILs), en tanto que CIN II y CIN III tambin pueden llamarse lesiones intraepiteliales escamosas de alto grado (HSILs) 1,2 La evaluacin citolgica funciona detectando clulas raspadas de la superficie de estas lesiones, que luego se clasifican como LSIL o HSIL por citologa. Adems, existen categoras citolgicas de ASC-US (clulas escamosas atpicas de significado incierto) para cambios celulares anormales que posiblemente muestran cambios menores de bajo grado, y ASC-H para clulas anormales que podran presentar anormalidades de alto grado. Tambin hay una ruta al (adeno) carcinoma glandular que incluye adenocarcinoma in situ (AIS) y clulas glandulares atpicas de significado indeterminado (AGUS).Referencias:Burd EM. Clin Microbiol Rev 2003; 16: 117.Solomon D y colab. JAMA 2002; 287: 21149.

  • DESANATURALIZACION DEL ADNSE LLEVA A CABO LA LISIS DE LAS CELULAS PARA LIBERAR Y DESNATURALIZAR LA DOBLE CADENA DE ADN DE LAS CELULAS CERVICALES DE LA MUESTRA.

    SE AGREGA BUFFER.SE LLEVA AL VORTEX.BAO MARIA 65 45

  • HIBRIDIZACIONLA SONDA DE ARN COMPLEMENTARIA SE UNE A LA CADENA EXPUESTA DEL ADN DEL PVH Mx. FORMA HIBRIDOS ARN-ADN

    SE AGREGA EL RVO CON LA SONDASE LLEVA A LA MICROPLACA DE HIBRIDACION A 65 60

  • CAPTURAEN LA FASE SOLIDA O MICRO PLACA SE UNEN LOS Ac ESPECIFICOS PARA EL HIBRIDO, CAPTURANDOLOS.

    SE DISPENSA EL HIBRIDO EN LA MICRO PLACASE LLEVA EL ROTADOR 60 1100 RPM.SE ELIMINAN LOS INESPECIFICOS.

  • DETECCION SE AGREGA EL CONJUGADO DE Ac + FA. PARA AMPLIFICAR SIGNIFICATIVAMENTE LA SEAL. PARA DETECTAR MINIMAS CANTIDADES DE ADN VIRAL.

    RVO 1 Ac + FCINCUBACION 30 A 25SE REALIZA MICRO LAVADO PARA ELIMINAR EL EXCESO DE Ac

  • DETECCION DE LA SEALEN EL LUMINOMETRO SE CUANTIFICA EL ADN VIRAL.

    SE AGREGA LA SLN QUIMIOLUMINISCENTE QUE SE UNE A LOS HIBRIDOS CAPTURADOS CUBIERTOS CON ANTICUERPOS MARCADOS CON FA PRODUCEN EMISION DE LUZ QUE ES MEDIDA.

  • LECTURA E INTERPRETACIONSE OBTIENE UN COCIENTE UNIDADES DE LUZ RELATIVA SOBRE EL VALOR DE CORTE.>1 POSITIVO
  • CONCLUSIONESVENTAJASES UNA PRUEBA MUY SENCIBLE Y ESPECIFICA PARA SEPARAR PVH AR DE PVH DE BR.TIENE UN ALTO VALOR PREDICTIVO.EVIDENCIA LA PRESENCIA DE PVH.SU APLICACIN ESTA RELACIONADA AL DESARROLLO DE VACUNA MAS ESPECIFICA.

    DESVENTAJASES MAS COSTOSA QUE EL PAP.NO TIENE UTILIDAD TERAPEUTICA.

  • GRACIAS

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    *Diapositiva 10Progresin de la enfermedad En esta diapositiva se muestra visualmente el desarrollo progresivo de los cambios celulares de la infeccin HPV al cncer cervical. Este proceso generalmente necesita 10 a 40 aos, aunque en muy pocos casos puede ocurrir en 1 o 2 aos.1 Los cambios CIN I pueden surgir luego de 3 meses desde la infeccin, CIN II al cabo de 6 meses, y CIN III en cuestin de 1 a 2 aos. Como se muestra en la diapositiva, las clulas anormales infectadas y CIN I tambin pueden designarse lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado (LSILs), en tanto que CIN II y CIN III tambin pueden llamarse lesiones intraepiteliales escamosas de alto grado (HSILs) 1,2 La evaluacin citolgica funciona detectando clulas raspadas de la superficie de estas lesiones, que luego se clasifican como LSIL o HSIL por citologa. Adems, existen categoras citolgicas de ASC-US (clulas escamosas atpicas de significado incierto) para cambios celulares anormales que posiblemente muestran cambios menores de bajo grado, y ASC-H para clulas anormales que podran presentar anormalidades de alto grado. Tambin hay una ruta al (adeno) carcinoma glandular que incluye adenocarcinoma in situ (AIS) y clulas glandulares atpicas de significado indeterminado (AGUS).Referencias:Burd EM. Clin Microbiol Rev 2003; 16: 117.Solomon D y colab. JAMA 2002; 287: 21149.